5–氨基乙酰丙酸（ALA）

5–氨基乙酰丙酸（ALA）作为生物体内卟啉化合物生物合成的关键前体，它参与植物生长发育的调节过程。适宜浓度的ALA可提高植物叶片净光合速率，促进叶片同化产物向根系分配，大幅度提高多种作物产量，并增强植物抗冷性和耐盐性。

ALA作为一种植物生长促进剂或者抗逆增强剂已经有研究报道。还有报道指出ALA与花青苷的合成积累有密切关系，但仅从果皮花青素积累以及果皮PAL酶活性变化等生理层面阐明了ALA促进苹果着色的原因。作者前期研究发现ALA同样与桃果实成熟和着色有一定关系。本试验中以晚熟桃品种‘早白花’为材料，研究了ALA处理对果实着色相关生理指标和基因表达的影响，以期探讨ALA调控桃果皮花色素苷积累的机制，为桃果实着色调控的深入研究提供帮助，为生产应用提供参考。

实验数据表明

1、ALA处理对果实生长的影响

对照果实在处理后25d成熟，ALA处理果实在处理后20d成熟，提早了5d左右。ALA处理与对照果实的生长都呈线性增长趋势（图1）。

2、ALA处理对果实可溶性固形物和可滴定酸含量的影响

ALA处理20d后的成熟果实单果质量和可溶性固形物含量与对照（25d时，成熟果实）相比没有显著差异，但300和100mg·L-1ALA处理的可滴定酸含量分别为0.11%和0.10%，显著低于对照的0.13%（图2）。

3、ALA 处理对果面色泽参数的影响

在果实发育成熟的过程中，随着果皮颜色由绿色转为红色，对照和处理色泽指标a*值和a*/b*由负转正，并逐渐升高，且以处理果实的a*值和a*/b*增加速度更为迅速，处理后20d，300和100mg·L-1ALA处理果实的a*值、a*/b*都显著高于对照，但与对照果实成熟时（处理后25d）无显著差异；色泽指标b*和h*值表现的下降趋势相似，处理后20d，300和100mg·L-1ALA处理的b*和h*值显著低于对照，但与对照成熟时（处理后25d）基本无显著性差异（图3）。

因此，ALA处理，尤其是300和100mg·L-1处理，虽然没有显著增加成熟果实的着色，但显著促进了桃果皮提前着色。该结果与样品的视觉观察结果（图4）一致。

4、ALA处理对果皮花色素苷积累的影响

‘早白花’果皮中花色素苷含量随果实发育呈明显的上升趋势（图5，A），ALA处理后果皮花色素苷含量在前期没有明显增加，处理后10d，300mg·L-1处理的果皮花色素苷含量开始迅速增加，至处理后20d，300和100mg·L-1处理的花色素苷含量分别达到5.20和3.56mg·g-1FW，而50mg·L-1处理与对照仅为2.51和2.04mg·g-1FW，差异显著。至对照果实成熟时（处理后25d）其果皮中花色素苷含量可达到4.66mg·g-1FW，与处理后20d时300mg·L-1 ALA处理的果皮花色素苷含量并没有显著性差异。因此，ALA处理在增加果皮花色素苷总量方面效果并不显著，但促进了果皮总花色素苷的提前合成与积累，本试验中以300mg·L-1ALA处理效果较显著。

5、ALA处理对果皮花色苷合成相关基因表达的影响

实时定量qRT-PCR分析结果（图5）表明，ALA处理对F3H的表达诱导效果不显著。UFGT、DFR、LDOX和CHS的表达显著受ALA处理诱导，处理后15d，300mg·L-1处理的4个基因的表达水平显著上调且相对表达量达到较高值，分别为对照的2.78、6.22、2.25和5.42倍；处理后20d，不同浓度ALA处理的4个基因表达量虽有所下降，但仍显著高于对照；对照果实在成熟时（处理后25d）4个基因才大量表达。值得注意的是50mg·L-1ALA处理后10d显著诱导了DFR、LDOX和CHS的表达，但随着果实继续发育，诱导效果低于300和100mg·L-1处理。

UFGT、DFR、LDOX和CHS的表达与花青素苷的积累表现出良好的一致性，特别是300mg·L-1处理使4个基因的表达高峰提前，推测这是本研究中ALA处理后‘早白花’果皮色素提前合成与积累的原因。

分析与总结

果实成熟是一个非常复杂的发育调控过程。有研究表明ALA处理可显著降低采收时梨果实淀粉含量，意味着ALA处理可能促进果实提早成熟。该结果与本试验中ALA处理使‘早白花’桃果实提前成熟的结果类似，这暗示了ALA在桃果实成熟过程中起到了一定的调控作用。

花色素苷合成的数量和时间决定了果实红色的表现和着色的时期。ALA能够提高苹果早期花色素积累的速率和总平均速率。同样，本试验中ALA处理（300和100mg·L-1）使得‘早白花’果皮色素代谢发生变化并促进了果实的提前着色。体现在果皮的a*值和a*/b*值提前显著增大；b*值和h*值提前显著下降。ALA处理后，果实各颜色指标的变化更迅速、更明显。

ALA处理能够有效促进UFGT、DFR、LDOX和CHS4个结构基因的表达高峰提前，进而促进‘早白花’果皮花色素苷提前合成积累，这从一定程度上揭示了ALA影响果实着色的机理。同时，本研究结果也证实了ALA处理可作为一种有效的方法用于桃果实成熟与着色机制的研究。